Çinli bilim insanları, memeli hücrelerinde gen ifadesini hızlı ve geri döndürülebilir şekilde kontrol etmeyi sağlayan yeni bir CRISPR tabanlı sistem geliştirdi. Tamoksifen-indüklenebilir CRISPRa/i platformu, gen aktivasyonu ve baskılanmasında daha düşük arka plan aktivitesi ve hızlı tepki süresi sunuyor.

Geleneksel sürekli ya da doksisiklin-indüklemeli CRISPR sistemlerine alternatif olarak tasarlanan bu yöntemde, CRISPR bileşenlerine modifiye edilmiş insan östrojen reseptör (ERT2) alanları eklendi. Bu alanlar, östrojen analoğu tamoksifen veya aktif metaboliti 4-hidroksi-tamoksifen (4OHT) varlığında aktif hale geliyor ve dCas9-füzyon proteinlerinin hücre çekirdeğine hızlıca taşınmasını sağlıyor.

4OHT uygulandığında, geliştirilen ERT2-CRISPRa/i yapıları hızla çekirdekte birikerek hedef genlerin ifadesini değiştiriyor. 4OHT çekildiğinde ise sistem etkisini geri alıyor ve gen ifadesi normale dönüyor. Sistem, verimlilik açısından mevcut yöntemlerle eşdeğer ya da daha üstün olup, daha düşük bazal aktivite ve daha hızlı indüksiyon sağlıyor.

Farklı hücre hatlarında yapılan deneylerde, gen ifadesindeki değişikliklerin fenotipik etkileri gözlemlendi. Bu özellikleriyle tamoksifen kontrollü iCRISPRa/i sistemi, işlev kazanımı veya kaybı gerektiren araştırmalarda ve potansiyel terapötik uygulamalarda zaman kontrollü gen düzenlemesi için değerli bir araç olarak öne çıkıyor.

Çalışma, Feng Wan (Southern Medical University) ve Bin Zhang (Huazhong University of Science and Technology) liderliğinde yürütülmüş ve 23 Haziran’da Cellular and Molecular Life Sciences dergisinde yayımlanmıştır.