Drosophila nasıl yakalanır ve besiyeri nasıl hazırlanır?
Drosophila yakalama
Genel olarak böcek kepçeleriyle çeşitli bitkiler üzerinden çok değişik türler yakalamak mümkündür. Böcek kepçesini oluşturan kağıt veya ağın dip kısmı ince bir çıkıntı halindedir. Buraya yerleştirilen uygun plastik tüp yakalanan sineklerin burada toplanmasını sağlar. Sinekler buraya toplandıktan sonra tüpün ağzı bir tıpa ile kapatılır ve yenisi yerleştirilir. Bununla beraber içine biraz yem koyularak yapılan tuzaklar en iyi Drosophila toplama yöntemidir.
Tuzak ile Drosophila toplamada iki faktör önemlidir:
1. Kullanılan yemin çeşidi
2. Tuzağın tipi
Fermantasyona uğrayan besin, maddelerine sinekler pozitif kemotaksi gösterdiklerinden bunlara doğru yönelirler. Fermente olmuş muz en iyi yemdir. Sinekler tuzaklardan çıkarılırken çok sarsılmamalıdır. Onların nakledilecekleri besinler yumuşak olmamalıdır. Yeni toplanan sineklerin parazit taşımadıklarına emin oluncaya kadar laboratuvar stoklarından uzak tutulmalıdır. Yakalanan Drosophilalar için besiyeri hazırlanmalıdır.
Drosophila besiyeri hazırlama
Drosophila ile çalışabilmek için çeşitli besiyerleri vardır. Ancak meyve sinekleri doğada fermente olan çeşitli bitki materyallerinin üzerinde bulunurlar fakat doğrudan meyve üzerinden beslenmezler. Mayalar bu sineklerin temel besin maddesini oluştururlar. Bu nedenle maya çoğalmasını sağlayan her türlü ortam onlar için iyi bir besin ortamıdır. Katı besiyerinin içeriği pekmez, mısır unu, muz veya yulaf ezmesi olabilir.
Örnek bir besiyeri hazırlama olarak şu protokol kullanılabilir:
1) 52 gram mısır unu (glikoliz ihtiyacı)
2) 47 gram şeker (karbon kaynağı)
3) 9,5 gram maya (besiyerinin fermente olması)
4) 2,5 gram agar (besiyerinin jelleşmesi)
5) 500 ml distile su
6) 3ml propiyonik asit (besiyerinin bozulmasını önler)
Kültür kabı olarak cam şişeler kullanılabilir. Bu şişeler iyice temizlendikten sonra ağızları pamukla ve sargı beziyle kapatılarak otoklav ile steril hale getirilir. Bir behere besiyeri içeriğinde bulunan mısır unu, şeker, maya, agar ve 500 ml su ilave edilir. Isıtıcılı manyetik karıştırıcıda kaynayana kadar karıştırılır ve kaynamasına yakın bir anda 3 ml propiyonik asit eklenir.
Hazır hale gelen besiyeri otoklavlanmış şişelere dikkatli bir şekilde etrafına bulaştırmadan dökülür. Daha sonra soğumaya bırakılır. Soğuduktan sonra ağızları pamuk ile kapatılarak buzdolabına kaldırılır. Kültür için gerekli olduğu zaman kullanılır.